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光学显微镜是实验室里比较常见的仪器，其主要的光学部件包括目镜，物镜，聚光镜，荧光滤色片镜组，光源等。

虽然常见，但并不是人人都了解显微镜的光路原理，实验过程中有很多小伙伴经常会遇到镜下信号看不到或者成像不清晰等问题。今天小编就给大家分享一些解决小问题的方法。

常见问题一：无信号

目镜下观察无信号

检查明场/荧光光源是否打开，光闸开关是否打开。

开关开启后，将光强适度调大，并调节合适的市场光阑和孔径光阑，以保证正常出光。

如进行荧光观察，检查Shutter光闸是否打开，并调节合适的光强。

选择对应荧光染料的滤色块，如进行明场观察则需要选择第4和第5个空位滤块。

调节好后，可以通过观察物镜出光口是否有光照输出，如发现没有光照输出则需要检查物镜是否卡到位。

如果出光口看到有光，但目镜下看不到样品，请将光路切换拉杆推进去则光路切换至目镜，然后再进行调焦操作。

真实故障案例：

客户观察的样品为CY5近红外荧光染料样品，光路切换完全正确，但目镜下无法观察到CY5红色的荧光信号要怎么办？

CY5为近红外染料相机的传感器对这一波段的光信号灵敏度低于可见光波段染料，如果荧光信号很弱则会遇到以上问题。需要把荧光光源光强调到最大，才能使得较弱的荧光信号在镜下观察到。

成像软件端无信号

将光路切换到相机后，大家可能会遇到以下两种情况，

出现白屏。一般是在明场观察的时候出现的问题，这时需要适当调弱明场光强，降低曝光时间。

出现黑屏。说明曝光不足，在确认荧光光源光闸都开启，加大曝光时间，直至出现图像信号。

常见问题二：图像不清晰

很多小伙伴在目镜下观察样品清洗后，再切换至软件中，发现成像不如镜下清晰，这时候只需缓慢调节细准焦螺旋，直至软件中图像清晰即可。

如果调节细准焦螺旋仍然无法使图像清晰，应检查样品是否摆放正确，样品需使用厚度为0.17mm的盖玻片，盖玻片一面要正对物镜。

实验使用的盖玻片如果厚度误差过大，就会有样品无法聚焦的问题，需要更换盖玻片。

以上就是显微镜常见问题及解决方法内容，如有任何疑问或有想了解的显微镜知识，欢迎留言~